上海晶抗生物雞ELISA試劑盒，核心是酶聯(lián)免疫吸附測定，專門針對雞源生物樣本（血清、血漿、組織勻漿、卵清、細胞上清等），定量檢測雞體內(nèi)的細胞因子、激素、抗體、病原抗原、營養(yǎng)指標、藥物殘留等靶標分子，原理與通用 ELISA 一致，但包被抗原 / 抗體、標準品、種屬特異性二抗均為雞種屬特異性，避免與其他物種交叉反應，保證檢測精準。

下面從核心原理、四大經(jīng)典方法原理、實驗通用流程、雞試劑盒專屬特點完整講解，通俗易懂，適配實驗實操理解。

一、ELISA核心總原理

ELISA 的本質(zhì)是抗原 - 抗體特異性結(jié)合 + 酶催化底物顯色的信號放大，兩大核心不可分割：

免疫特異性：抗原與對應抗體只發(fā)生一對一的特異性結(jié)合，如同鑰匙配鎖，雞源靶標只會與試劑盒內(nèi)的雞特異性識別分子結(jié)合，非目標物質(zhì)不結(jié)合、不干擾。

酶促信號放大：結(jié)合的免疫復合物上標記辣根過氧化物酶（HRP） 或堿性磷酸酶（AP），酶能催化無色底物快速生成有色產(chǎn)物，產(chǎn)物顏色深淺與樣本中靶標分子的含量成正比，通過酶標儀測吸光度（OD 值），對照標準曲線即可計算出樣本中靶標的精確濃度。

簡單總結(jié)：靶標越多 → 結(jié)合的酶標物越多 → 顯色越深 → OD 值越高 → 定量結(jié)果越高。

二、雞 ELISA 試劑盒的 4 種方法原理

雞 ELISA 根據(jù)檢測靶標不同，分為測抗體、測抗原、小分子、大分子四類，對應 4 種經(jīng)典方法，也是市面上雞試劑盒主流類型：

1. 間接 ELISA（：檢測雞源抗體）

適用靶標：雞抗體、雞新城疫抗體、雞傳染性法氏囊抗體、雞減蛋綜合征抗體、雞支原體抗體等禽病特異性抗體，用于免疫效果評價、疫病篩查。

實驗原理流程：

包被：微孔板預包被雞特定病原的純化抗原（如新城疫病毒抗原），固相化在孔底。

加樣：加入待檢雞樣本（血清），樣本中的雞特異性抗體與包被抗原結(jié)合。

加酶標二抗：加入酶標記的抗雞 IgG 二抗（種屬核心，只識別雞 IgG，不識別鴨、鵝、哺乳動物抗體），二抗與結(jié)合在抗原上的雞抗體結(jié)合。

加底物顯色：酶催化底物顯色，終止液終止反應，測 OD 值。

定量：OD 值越高，說明雞體內(nèi)針對該病原的抗體含量越高。

2. 雙抗體夾心法（：檢測雞源大分子抗原 / 蛋白）

適用靶標：雞白介素 (IL-1β、IL-6)、雞腫瘤壞死因子 (TNF-α)、雞生長激素、雞胰島素、雞卵清蛋白、雞傳染性支氣管炎病毒抗原等大分子蛋白、細胞因子、病原抗原。

實驗原理流程：

包被：微孔板預包被雞靶標蛋白的捕獲抗體（單抗 / 多抗，雞種屬特異）。

加樣：加入雞樣本，樣本中的靶標抗原與捕獲抗體特異性結(jié)合。

加酶標檢測抗體：加入酶標記的雞靶標檢測抗體，與抗原的另一位點結(jié)合，形成捕獲抗體 - 靶標抗原 - 酶標檢測抗體的 “三明治" 復合物。

底物顯色、測值：顯色深淺與抗原濃度正相關(guān)，計算樣本抗原含量。

核心特點：只能測分子量≥10kDa 的大分子，小分子（激素、藥物殘留）無法用此法，因為小分子只有一個結(jié)合位點，無法形成夾心結(jié)構(gòu)。

3. 競爭法（專用：檢測雞源小分子物質(zhì)）

適用靶標：雞雌二醇、睪酮、孕酮、甲狀腺激素、磺胺類藥物殘留等小分子激素、獸藥、真菌毒素。

實驗原理流程（兩種形式，試劑盒常用酶標抗原 / 酶標抗體競爭）：

包被：微孔板包被雞小分子靶標的特異性抗體。

加樣 + 加酶標抗原：待檢雞樣本中的游離小分子抗原，與酶標記的小分子抗原，競爭結(jié)合孔底的有限抗體位點。

結(jié)合規(guī)律：樣本中游離小分子越多，占據(jù)的抗體位點越多，酶標抗原能結(jié)合的位點就越少 → 顯色越淺。

定量：OD 值與靶標濃度成反比，顏色越淡，樣本中小分子含量越高。

4. 捕獲法（專用：檢測雞 IgM 類早期抗體）

適用靶標：雞疫病早期感染 IgM 抗體（IgM 是機體感染后出現(xiàn)的抗體，用于早期快速診斷）。

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